Estudio de enzimas de la vía biosintética de cefamicina C en Nocardia lactamdurans LC411 y en variantes Amy

Resumen

La biosintesis de cefamicina c por nocardia lactamdurans tiene lugar a traves de una via biosintetica que se inicia con la formacion del tripeptido (l-alfa-aminoadipil) - l-cisteinil-dvalina (acv) por la enzima acv sintetasa, seguida de la ciclacion de este tripeptido a isopenicilina n por la isopenicilina n sintasa (ipns). A continuacion, la isopenicilina n epimerasa (ipne) convierte isopenicilina n a penicilina n. Esta ultima enzima es muy labil. La ipns de n. Lactamdurans es un monomero, ya que el peso molecular de la forma no desnaturalizada de la enzima, calculado por filtracion en gel es identico al determinado por sds-page: 37500 da. Su punto isoelectrico es 5.5 la ipne de n. Lactamdurans fue purificada 93.2 veces. Es estabilizada por fosfato de piridoxal y tiene un peso molecular calculado por filtracion en gel de 59000. Una banda proteica de 59000 da. Y pi 5.1 - 5.26, se enriquece en fracciones activas analizadas en sds-page. Por otra parte, n. Lactamdurans var. Amy-, una cepa que no produce cefamicina c, posee ipns e ipne antigenicamente similares a las de la cepa amy+ , proteinas que se visualizan en electroforesis bidimensional.