Purificación y caracterización de la glucosidasa II de hígado de ratas control y de ratas tratadas crónicamente con etanol

  1. SANTA CECILIA PRIETO ANGELINES JULIA
Dirigée par:
  1. Josefa María Alonso Directeur/trice
  2. Pedro Calvo Fernández Directeur/trice

Université de défendre: Universidad de León

Année de défendre: 1991

Jury:
  1. José Antonio Cabezas Fernández del Campo President
  2. Miguel Ángel Chinchetru Manero Secrétaire
  3. María Dolores de Arriaga Giner Rapporteur
  4. Tomás Girbés Juan Rapporteur
  5. Juan Pablo Barrio Lera Rapporteur

Type: Thèses

Teseo: 29437 DIALNET

Résumé

Se ha aislado la fraccion microsomal que presenta actividad alfa-glucosidasa, a partir de ratas control y de ratas tratadas cronicamente con etanol. A continuacion, la glucosidasa ii se solubilizo con triton x-100, se purifico a homogeneidad en ambas fuentes y se estudiaron las caracteristicas fisico-quimicas y cataliticas, no observandose ninguna diferencia significativa entre ambos lotes de ratas, salvo la estabilidad a 4 grados c. La enzima nativa es un tetramero formado por 4 subunidades iguales (mr. 106 kda). El ph optimo fue de 6,8. La energia de activacion fue de 13,54 kcal/mol. La glucosidasa ii presenta dos centros de union para el pnp-glc: el centro activo 1 (centro de alta afinidad) y el centro 2 (centro de baja afinidad). El tipo de inhibicion -con respecto al centro 1- para la glucosa, maltosa, -d-gluconolactona, cacl2 ymgcl2 fue competitiva total, competitiva parcial, parabolica, no competitiva y no competitiva, respectivamente. La glucosa puede unirse al centro 1, la maltosa al centro 2 y la lactona a ambos centros. Tambien se describio por primera vez, el siguiente modelo de union e hidrolisis del sustrato fisiologico, donde la glucosa mas externa es liberada en el centro activo 2 de nuestro modelo, y la glucosa restante en el centro activo 1 formandose el producto man9glcnac2-proteina.