Papel del sistema inmune y la microbiota intestinal en el daño hepático inducido por fármacos. Búsqueda de nuevos biomarcadores

Resumen

El daño hepático inducido por fármacos (DILI) es una condición infrecuente, pero puede tener consecuencias graves para los pacientes, ya que puede resultar en fallo hepático fulminante. El mecanismo subyacente de DILI no se comprende completamente y no existen biomarcadores de esta enfermedad para uso clínico. Este estudio doctoral se enfoca en la evaluación de biomarcadores potenciales, y mejorar el conocimiento del mecanismo molecular de DILI. Se plantean tres hipótesis principales: que los biomarcadores séricos miR-122, OPN, ¿-GST, K18 y ccK18 podrían tener potencial diagnóstico y pronóstico en el DILI, que el sistema inmunitario adaptativo podría estar involucrado en el desarrollo de la enfermedad, y que los pacientes con DILI podrían presentar una composición de la microbiota intestinal diferente. Para contrastar estas hipótesis se propusieron varios objetivos. 1. Validar y cualificar los biomarcadores candidatos en muestras de DILI, daño hepático agudo no DILI y controles con el hígado sano, mediante ELISA y la plataforma SIMOA. 2. Estudiar el papel del sistema inmunitario adaptativo mediante el análisis de perfiles de poblaciones linfocitarias y niveles de ¿immune-checkpoints¿ en muestras de sangre periférica. Además, comparar los niveles de citocinas y quimiocinas en los tres grupos de estudio utilizando un inmunoensayo múltiple. 3. Analizar la composición de la microbiota intestinal mediante pirosecuenciación para determinar posibles diferencias entre los grupos de estudio. Los biomarcadores candidatos permitieron distinguir los casos de DILI y daño hepático agudo no DILI de los controles con el hígado sano. Sin embargo, no permitieron una distinción clara entre DILI y daño hepático agudo no DILI. La ccK18 mostró el mayor potencial para distinguir entre DILI y daño hepático agudo no DILI, mientras que la OPN mostró potencial como biomarcador pronóstico para el daño hepático. En cuanto al sistema inmunitario adaptativo, se encontraron diferencias significativas en las poblaciones de linfocitos y niveles de los ¿immune-checkpoints¿ entre los grupos de estudio. Además, los niveles incrementados de quimiocinas podrían reflejar un reclutamiento de células periféricas hacia el hígado. Estos resultados sugieren la implicación del sistema inmunitario adaptativo en el desarrollo de DILI. Por último, en el DILI se observó un descenso de la diversidad de la microbiota intestinal en el momento agudo del episodio. En conclusión, los hallazgos apoyan la teoría de que un estrés y daño celular en el hígado causado por los fármacos, desencadena la liberación de señales moleculares de daño. Estas señales activan las células del sistema inmune innato y desencadenan una respuesta inflamatoria en el hígado. La detección de quimiocinas y la activación de linfocitos T periféricos parece estar indicando su reclutamiento hacia el hígado. El incremento de ¿immune-checkpoints¿ inhibidores sugiere que la respuesta inmune adaptativa promueve la tolerancia inmune para limitar el daño. Además, la disbiosis observada de la microbiota intestinal podría aumentar la llegada de componentes bacterianos al hígado, afectando a la tolerancia inmune. Una mejor comprensión del mecanismo de DILI ayudaría la identificación de biomarcadores específicos para esta condición.