Estudio de chlamydia psittacii mediante inmunomicroscopia electronica

Resumen

En el presente trabajo se ha investigado la localización de una serie de antígenos de las especies del género Chlamydia que afectan a los rumiantes (Chlamydia psittaci serotipo 1 y Chlamydia pecorum serotipo 2), utilizando de forma combinada tres tipos de técnicas para inmunomicroscopía electrónica: técnica sin inclusión y técnica pre-inclusión, ambas para el estudio de antígenos situados en la superficie clamidial, y técnica post-inclusión que permite la detección también de antígenos situados en el interior de la bacteria. Además utilizando las técnicas puestas a punto en el estudio sobre las clamidias, se ha extendido el trabajo a la localización de proteínas clamidiales expresadas en Escherichia coli recombinantes y a la detección de las clamidias en un modelo de infección in vivo en ratonas gestantes. Los resultados obtenidos con los antígenos de C. psittaci estudiados muestran que el lipopolisacárido clamidial se encuentra localizado en la superficie de los cuerpos reticulares (formas metabólicas), mientras que en los cuerpos elementales (formas infectivas) su localización es interna. Una localización similar es encontrada en la proteína de 80-90 kDa (proteína propuesta como proteína de diagnóstico), encontrándose en la superficie de los cuerpos reticulares, y en el espacio periplásmico de los cuerpos elementales. Por el contrario, la proteína de 110 kDa (proteína propuesta para su empleo como vacuna subcelular) y la proteína de 30 kDa se encuentran localizadas en la superficie de ambas formas clamidiales, encontrándose en mayor cantidad la primera. De los diferentes antígenos de C. pecorum testados, tan sólo con el lipopolisacárido hemos encontrado resultados positivos, siendo estos idénticos a los obtenidos con el lipopolisacárido de C. psittaci. El marcaje de la proteína de diagnóstico clonada en los E. coli recombinantes muestra una localización citoplasmática, aunque en un