Caracterización de cepas de Escherichia coli con fenotipos de multirresistencia inducidos o seleccionados in vitro con antimicrobianos o con fármacos no antimicrobianostesis doctoral

Resumen

El fenotipo de múltiple resistencia a antimicrobianos (fenotipo MAR) puede ser inducido en cepas de E. coli con diferentes compuestos como el salicilato de sodio y diazepam entre otros o tambien puede ser adquinrdo por mutaciones debidas a la presion selectiva ejercida por los antimicrobianos La sobre expresion de los activadores transcripcionales MarA SoxS y Rob resulta en el fenotipo Mar que se caracteriza por una disminuida susceptibilidad a multiples antimicrobianos debido a la disminucion en la expresion de la porina F y al incremento de expresion de AcrAB Otro de los reguladores transcripcionales implicados tambien en la respuesta bacteriana a situaciones de estres es SdiA cuya activacion resulta en incrementados niveles de trasnscripción de componentes de sistemas de eflujo activo como acrA, acrB, acrE, acrF, acrD y tolC. En este trabajo se estudiaron si otros nueve medicamentos no antibioticos utilizados en cirugia (Clonazepam Ketorolaco Clorpromazina Dexametasona Haloperidol Metamizol Diclofenaco Fenobarbital Propacetamol) pueden inducir al igual que el salicilato el fenotipo Mar en cepas susceptibles de E. coli AGIOO. Asimismo se evaluó la posible selección de mutantes estables multirresistentes con fármacos no antimicrobianos (diazepam y salicilato) a partir de dos cepas de E. coli de origen clínico. Los mutantes fueron caracterizados y comparados con los mutantes seleccionados con antimicrobianos (ceftazidima y lomefloxacina) a partir de las mismas cepas origen. Mediante los ensayos de induccion demostramos que los nueve medicamentos usados en cirugia son capaces de inducir al igual que el salicilato el fenotipo de multiple resistencia a antibioticos en la cepa sensible de E coli AGIOO y que la capacidad de inducir multirresistencia dependia de la dosis o concentración de fármaco utilizada y no de la estructura química del compuesto. En la seleccion in vitro de mutantes multirresistentes se demostro que es posible seleccionar in vitro mutantes multirresistentes estables de E coli con farmacos no antimicrobianos (diazepam) y con salicilato de sodio Estos mutantes presentaron patrones y mecanismos de resistencia similares a los hallados en los mutantes seleccionados con antimicrobianos (ceftazidima y lomefloxacina). El desarrollo de múltiple resistencia generada por drogas sean o no antimicrobianos se asocio a la sobre expresion de PBP3 que junto a la disminucion de la expresion de la porina F y al incremento del eflujo activo dio lugar a incrementos de 2 128 veces en la resistencia a ceftazidima cefpirome y aztreonam en los mutantes seleccionados Asimismo, se encontraron indicios de la sobre-expresión del regulador transcripcional SdiA en los fenotipos de multirresistencia.