Desarrollo de herramientas de tipificación y diagnóstico aplicadas al estudio de Mycoplasma hyorhinis y evaluación de un modelo experimental de neumonía en lechones

Zusammenfassung

Rubén Sebastián Rosales Santana ¿ Título de tesis: Desarrollo de herramientas de tipificación y diagnóstico aplicadas al estudio de Mycoplasma hyorhinis y evaluación de un modelo experimental de neumonía en lechones Aunque el papel de Mycoplasma hyorhinis como organismo patógeno en ganado porcino se ha encontrado asociado por lo general a cuadros de artritis, otitis y poliserositis, diversos estudios epidemiológico recientes han demostrado la posible implicación de este microorganismo como agente etiológico primario en enfermedad respiratoria en cerdos compatible con aquellos observados en casos de neumonía enzoótica porcina, causada por el agente etiológico clásico, M. hyopneumoniae, y del complejo respiratorio porcino. Debido al limitado conocimiento de la variabilidad genética y antigénica de este microorganismo decidimos enfocar la primera de parte de esta tesis al estudio y desarrollo de diversas técnicas de tipificación molecular. Dentro de las técnicas desarrolladas, VNTR destacó como la herramienta de elección para el análisis de la epidemiología molecular de M. hyorhinis. El análisis antigénico demostró una escasa variabilidad entre aislados con la presencia de varias antígenos inmunodominantes que pueden jugar un papel en el desarrollo futuro de herramientas de prevención y control frente a este microorganismo. Con el fin de demostrar la capacidad de M. hyorhinis para causar cuadros de neumonía en lechones se desarrolló un modelo experimental de infección. M. hyorhinis fue capaz de producir lesiones pulmonares indistinguibles a nivel micro y macroscópica de aquellas producidas por el agente clásico de la NEP. Estos datos demuestran la evidencia observada en estudios epidemiológicos de campo y ponen en duda todos aquellos resultados diagnósticos basados únicamente en la evidencia patológica. El desarrollo de herramientas diagnósticas mejoradas aplicadas a M. hyorhinis se basó en la técnica de ELISA indirecto y la PCR cuantitativa a tiempo real. Ambas técnicas demostraron ser de gran utilidad para el análisis de infecciones causadas frente a M. hyorhinis y junto con la técnica de Western blot desarrollada en esta tesis suponen herramientas de diagnóstico muy útiles en el campo de la sanidad animal porcina