Length polymorphism in the ribosomal DNA intergenic spacers of "Lens" species

Résumé

Los espaciadores intergénicos del DNA ribosomal (el IGS o espaciador intergénico del rDNA 18S, 5.8S, y 24S, y el NTS o espaciador no transcrito del rDNA 5S) de lenteja (L. culinaris spp. culinaris) mostraron muy poca variabilidad intraespecífica, tanto en cultivares como en variedades locales. De todos los materiales de esta especie se obtuvieron productos de amplificación por PCR con una longitud de unas 3200 pb, no observándose diferencias significativas mediante separación por electroforesis. Sin embargo, el polimorfismo intraespecífico aumentó mediante la digestión con endonucleasas de restricción (BspHI, StuI, y BstBI) de los IGS amplificados por PCR o por el uso de cebadores específicos que amplificaban segmentos particularmente variables del IGS. Estos segmentos incluyen dos familias de secuencias cortas agrupadas. Con ambos métodos se observaron diferencias entre materiales de lenteja, utilizables como posibles marcadores genéticos en posteriores trabajos de mejora o genética, como la confección de mapas genéticos. Se observaron varios productos de amplificación NTS en cada planta, cuyo tamaño osciló entre unas 300 y 900 pb en la lenteja cultivada, no observándose diferencias entre estos materiales. Sí se observaron diferencias entre L. culinaris spp. culinaris y las especies silvestres del género Lens (incluido el ancestro silvestre del cultigen, L. culinaris spp. orientalis), tanto en la longitud del IGS, como en su patrón de restricción, y en los conjuntos de NTS.