Estudios de los mecanismos de inmunomodulación por Fasciola hepáticaApoptosis y linfocitos T reguladores

Resumen

La fasciolosis causada por Fasciola hepatica es una enfermedad económicamente muy importante en rumiantes en climas templados. F. hepatica ha desarrollado una amplia variedad de mecanismos para munomodular o suprimir la respuesta inmune del hospedador haciéndola inefectiva, esto permite la supervivencia del parásito durante años. Esto constituye un serio obstáculo para la creación de vacunas protectoras en rumiantes. El conocimiento de los mecanismos de inmunomodulación llevados a cabo por F. hepatica para evadir la respuesta inmunitaria del hospdador es crucial para mejorar el diseño de vacunas. En infecciones por helmintos, los eosinófilos juegan un importante papel tanto en el desarrollo de la patología como en la defensa del hospedador. La apoptosis de estas células efectoras ha sido descrita como uno de los principales mecanismos de inmunosupresión o evasión durante las infecciones por helmintos. Existen trabajos que sugieren que los productos de excreción y secreción de F. hepatica inducen la apoptosis de los eosinófilos y de macrófagos peritoneales in vitro, así en los infiltrados inflamatorios en ratas in vivo. El empleo de anticuerpos anti-caspasa 3 es un método fácil, reproducible y sencillo para estudiar la presencia de apoptosis. El primer objetivo de este estudio, incluido en el Primer Trabajo fue demostrar la existencia de este fenómeno, como método de evasión de la respuesta inmunitaria del hospedador en ovejas infectadas con F. hepatica, in vivo.En el Segundo Trabajo el objetivo fue el estudio de la apoptosis de los leucocitos peritoneales en ovejas infectadas experimentalmente con F. hepatica durante la fase migratoria peritoneal en el hospedador. Fueron empleados cinco grupos, (n=5). El grupo 1 fue usado como control no infectado (control negativo), mientras que los grupos 2-5 fueron infectados oralmente con 200 mtc y sacrificados a los 1, 3, 9 y 18 dpi, respectivamente. El fenómeno de la apoptosis fue detectado mediante el empleo de tres métodos diferentes: 1) inmunocitoquímica empleando un anticuerpo policlonal anticaspasa- 3 activa; 2) ensayo de citometría de flujo usando Anexina V-FITC/ yoduro de propidio; y 3) microscopía electrónica de transmisión (TEM). El objetivo del Tercer Trabajo de la presente Tesis Doctoral fue evaluar la presencia y distribución de linfocitos T reguladores en el hígado y en los nódulos linfáticos en ovejas y cabras infectadas con F. hepatica durante las fases agudas y crónicas de la infección.