Biosíntesis de ácido colomínico en Escherichia coli K-235

Abstract

Se ha elaborado un medio quimicamente definido que contiene xilosa y prolina como unicas fuentes de carbono y nitrogeno respectivamente y en el que e. Coli k-235 produce 1.350 microg/ml de acido colominico (homopolimero capsular formado por residuos de acido n-acetilneuraminico en enlaces alfa2 - 8) cuando las incubaciones se realizan a 250 rpm y 37 grados c. Esta produccion disminuye en un 50% con la adicion de tunicamicina (5 microg/ml) al medio y se bloquea cuandolas incubaciones se realizan a bajas temperaturas ((=20 grados c). Estudios sobre la biosintesis de acido colominico in vitro nos han permitido identificar una proteina que participa en la polimerizacion de los residuos de n-acetilneuraminico actuando como molecula iniciadora en la formacion de un complejo proteina-n-acetilneuraminico al que consideramos como el aceptor endogeno que interviene en el proceso biosintetico de este polimero capsular. Este complejo no se forma cuando e. Coli k-235 crece a bajas temperaturas ((=20 grados c) y su sintesis esta disminuida (50%) cuando el microorganismo crece en presencia de tunicamicina. Asimismo el transporte del acido n-acetilneuraminico en e. Coli k-235 se realiza a traves de un mecanismo activo que es maximo a 37 grados c y ph 7 0; es sensible al choque osmotico y tiene una km de 30 micro-m. Ademas se reprime por glucosa se induce por n-acetilneuraminico y se inhibe por n-acetilglucosamina glucosamina l-metionina y l-norleucina. Este sistema parece ser independiente del sistema de sintesis del acido colominico.