Variabilidad genética en "Lens" (Miller)análisis de los espaciadores intergénicos ribosomales

Résumé

Las leguminosas representan una de las fuentes más ricas y asequibles de proteínas para la alimentación humana, siendo la lenteja (Lens culinaris, Medik.) uno de los cultivos tradicionales en España. Una de las herramientas útiles para detectar variabilidad es a nivel de los genes del DNA ribosomal. Cada unidad repetida del DNAr contiene las regiones codificantes, los corespondientes espaciadores internos y un espaciador intergénico (IGS) cuya longitud varía entre 1 y 13 kpb, y que se debe a la presencia de un número variable de copias de una o más familias de secuencias repetidas. A pesar de estas diferencias el papel funcional de IGS se ha conservado siendo una unidad reguladora compleja con secuencias relacionadas con las transcripción el pre-procesamiento del rRNA. Por su parte los genes ribosomales 5S están formados por una región codificadora altamente conservada de 120 bp y un espaciador no transcrito cuya longitud varia entre 80 y 900 bp. En los genomas de plantas, los genes que codifican para ARNr de 5S no se encuentran ligados a los genes de ARNr de 18S, 5.8S y 25S siendo posible visualizar su localización cromosómica mediante FISH (hibridación in situ por fluorescencia). Los objetivos desarrollados en este trabajo han sido varios, en primer lugar se estimó la variabilidad en longitud intra e interespecífica del espaciador intergénico del DNA ribosomal 25S-18S en el género Lens, y se determinó la secuencia completa del espaciador intergénico del DNA ribosomal 25S-18S de Lens culinaris culinaris variedad Verdina, estableciendose su estructura a nivel molecular y localizando secuencias reguladoras. Por otro lado se estudió la variabilidad en longitud intra e interespecífica del espaciador del DNA ribosomal 5S en el género Lens, y se determinó la secuencia de alguno de los espaciadores ribosomales 5S de Lens culinaris culinaris y de la especie silvestre Lens culinaris orientalis, localizando también secuen