Biología Molecular de "Rhodococcus fascians"análisis del genoma y determinantes genéticos de la fascinación

Abstract

La organizacion del genoma de la bacteria fitopatogena rhodococcus fascians ha sido determinada, en este trabajo, por medio de electroforesis en campo pulsado (pfge). La cepa tipo, dsm 20669, posee un genoma compuesto por un unico cromosoma de 5.6 mb. La cepa fitopatogena d188 posee un cromosoma de 5.6 mb, un plasmido lineal de 200 kb (pfid188) y un plasmido circular de 138 kb (pd188). La estirpe cect 3001 posee un cromosoma de 7.3 mb, un megaplasmido de 640 kb (pirn640) y un plasmido circular de 120 kb (pcyp120). Se ha construido una genoteca con dna de r. Fascians d188 en el cosmido phc79.4, a partir de la cual se ha clonado y secuenciado un operon ribosomal completo (rrnb). A partir de las secuencias de rdna se ha construido el vector integrativo pic44, que se ha utilizado para insertar el locus fas (portador del gen que codifica la isopentenil-transferasa de citoquininas) en cualquiera de los operones ribosomales de la cepa d188.5. La expresion del locus fas inserto en cualquiera de los operones ribosomales de r. Fascians d188.5 puede ser detectada por rt-pcr. La expresion del operon fas es dependiente de una sustancia inductora liberada por las plantas en respuesta a la infeccion por r. Fascians.