Identificación y caracterización de la S-adenosilmetionina sintetasa de Leishmania donovani

Abstract

La metionina adenosiltransferasa (MAT), anteriormente conocida como S-adenosilmetionina sintetasa, cataliza la síntesis de S-adenosilmetionina (AdoMet), utilizando ATP y L-metionina como sustratos. La AdoMet es una molécular clave en el metabolismo celular, pues actúa como donante de grupos metilo en el 90% de las reacciones de transmetilación de la célula y una vez descarboxilada cede su grupo amino propilo para la síntesis de poliaminas. En este trabajo hemos identificado y caracterizado la MAT de Leishmania donovani. El gen que codifica para dicha enzima está constituido por una secuencia de nucleótidos de 1179 pb y genera una polipéptido de 392 aminoácidos con un peso molecular teórico de 43 kDa. Tras la purificación de esta proteína, procedimos a su caracterización enzimática y al estudio mutacional de los aminoácidos implicados tanto en la catálisis como en el mantenimiento de la estructura. Finalmente, realizamos la expresión homóloga de la MAT en promastigotes de L.donovani y observamos, entre otras cosas, que los promastigotes son capaces de expulsar, por un mecanismo desconocido, el exceso de AdoMet que les resulta perjudicial.