Caracterización de cultivos celulares angiogénicos obtenidos de órganos linfoides de trucha arco iris, "Oncorhynchus mykiss"

Resumen

En peces, no hay prácticamente modelos de cultivo de células endoteliales y aunque se ha descrito su aislamiento y cultivo a muy corto plazo en algunas especies, sólo se ha descrito angiogénesis espontánea in vitro en peces, en cultivos a largo plazo de pronefros de O.mykiss y usando la línea de estroma TPS, derivada de un subcultivo de pronefros de esta especie. El objetivo de esta tesis es el desarrollo de modelos experimentales, con el fin de tratar de obtener líneas celulares angiogénicas y perfeccionar las condiciones de cultivo para obtener angiogénesis espontánea in vitro de una forma más controlada en O. Mykiss. Hemos obtenido dos nuevas líneas celulares de trucha arco iris; una del estroma del pronefros que denominamos TPS-2 y otra del estroma de bazo denominada TSS. Ambas carecen de actividad hematopoyética per se, pero la línea TPS-2 es capaz de favorecer la hematopoyesis cuando se cocultiva con suspensiones alogénicas de pronefros. La línea TPS-2 está formada principalmente por células epitelioides y un menor número de células fibroblásticas y gigantes, lo que la distingue de la línea TSS, en la que predominan las células fibroblásticas sobre los otros tipos. Por sus características, esta línea contiene diversas poblaciones del estroma hematopoyético del pronfefros, con predominancia de las células endoteliales. La línea TSS está formada por al menos dos tipos celulares entre las que predominan las células epitelioides, es débilmente adherente al plástico, aunque las células se adhieren fuertemente entre ellas, crece de forma distintiva, formando grupos celulares y trabéculas, y presenta el fenómeno de inhibición por contacto. Por estas características, junto con su alta capacidad endocítica y marcaje positivo para la lectina UEAI, se asemeja a líneas de células endoteliales, especialmente del tipo de las células sinusoidales. Hemos demostrado que la técnica de cultivo a cor