Conservacion a largo plazo de embriones teleosteos

  1. Robles Rodríguez, Vanesa
Supervised by:
  1. María Paz Herráez Ortega Director

Defence university: Universidad de León

Fecha de defensa: 06 October 2004

Committee:
  1. María Carmen Sarasquete Reiriz Chair
  2. Luis Anel Rodríguez Secretary
  3. José Benito Peleteiro Alonso Committee member
  4. Tiantian Zhang Committee member
  5. Olvido Chereguini Fernández-Maquieira Committee member
Department:
  1. DEP. DE BIOLOGÍA MOLECULAR

Type: Thesis

Teseo: 124505 DIALNET

Abstract

La compleja y multi-compartimentada estructura de los embriones de peces, junto a su gran tamaño, alto contenido en vitelo y elevada sensibilidad al frío, han dificultado su criopreservación, hasta el punto de llegar a impedir totalmente su supervivencia tras el proceso. Los beneficios derivados de la criopreservación de embriones de peces son muy numerosos, tanto en el campo de la acuicultura como en el de la conservación. El presente trabajo se ha realizado principalmente con embriones de rodaballo (Scophthalmus maximus) aunque se han utilizado otras especies como el pez cebra (Danio rerio) y el winter flounder (Pleuronectes americanus). Para la obtención de una criopreservación eficaz, es necesario usar compuestos crioprotectores que estén presentes en todos los campartimentos embrionarios y que protejan a las células de la congelación. No obstante la presencia de múltiples barreras rodeando cada compartimento dificulta este objetivo. Por ello gran parte de los esfuerzos se han dirigido hacia la búsqueda de métodos de permeabilización que incrementen la penetración de los crioprotectores en el embrión. También se realizaron estudios de toxicidad a difernetes crioprotectores permeables y no permeables y formularon soluciones vitrificantes y protocolos de incorporación de los crioprotectores. Tras la incorporación de los criporotectores, los embriones fueron vitrificados, estudiando varios factores que desempeñan un importante papel en el éxito o fracaso del proceso. Tras la vitrificación se evaluó la morfología embrionaria a microscopía óptica, y la actividad de enzimas citoplasmáticas mediante espectrofotometría, y se observó que entre los embriones que exhiben buena morfología, han de existir, según los resultados obtenidos, algunos en los que la mayor parte de sus células hayan mantenido intactas sus membranas celulares y una actividad metabólica adecuada. Los experimentos realizados con la especie sub