Isocitrato deshidrogenasa dependiente de NADP[+] de "Cephalosporium acremonium"purificación y caracterización
- OLANO DIEZ, JOSEFA
- Joaquín Soler Molina Director/a
- María Dolores de Arriaga Giner Directora
Universidad de defensa: Universidad de León
Fecha de defensa: 21 de junio de 1997
- Arturo Pérez Eslava Presidente/a
- Félix Busto Ortiz Secretario
- José Luis Iborra Pastor Vocal
- Ángel Reglero Chillón Vocal
- Juan Luis Serra Ferrer Vocal
Tipo: Tesis
Resumen
La idh-nadp de c. Acremonium es un dimero de masa molecular 135-140 kda, formada por dos subunidades identicas. Es especifica para nadp y ds-isocitrato. Muestra un ph optimo de 8,5-9,25. La enzima mostro una actividad maxima a 60 grados c. Y mostro inactivacion por temperatura, siguiendo una cinetica de primer orden; la presencia de sustratos incremento la estabilidad termica. La enzima fue inactivada por depc poniendo de manifiesto que aunque deben modificarse 6 residuos de histidina por subunidad para la completa inactivacion de la enzima solo uno de ellos es esencial para la catalisis, este residuo puede estar localizado en una region del centro de union del sustrato cercana a la zona de union del nadp. La enzima tambien fue inactivada phmb, el analisis de inactivacion y proteccion parcial por histidina sugiere que este reactivo modifica residuos de cisteina e histidina conjuntamente. La enzima fue ademas inactivada reversiblemente por plp en dos etapas; la inactivacion se debio a la modificacion de residuos de lisina implicados en la catalisis y/o en la orientacion de los sustratos.