Estudio de determinantes de resistencia a tetraciclinas en patógenos porcinos de la familia pasteurellaceae

Resumen

La familia pasteurellacea está formada por tres géneros, Haemophilus, Pasteurella y Actinobacilus. Haemophilus y Actinobacilus son patónenosporcinos de gran relevancia. El uso de antibióticos para el tratamiento de infecciones producidas por estos patógenos y como aditivos en la alimentación animal ha ocasionado la aparición de cepas resistentes. Nos proponemos realizar un estudio de las resistencias a algunos de losantibióticos más utilizados en el tratamiento de estas infecciones. Son objetivos de esta tesis la cuantificación del nivel de resistencia, la determinación de sus bases genéticas y el análisis de sus mecanismos de diseminación. Se utilizarán colecciones de cepas de Actinobacillus pleuropneumoniae y Haemophilus paranuis del Departamento de Patología Animal de la Universidad de León. Los antibióticos seleccionados para el estudio son las tetraciclinas (antibióticos de amplio espectro y bajo coste, por lo que son frecuentemente empleados en el tratamiento de infecciones por estos y otros patógenos) y las quinolonas (antibióticos relativamente nuevos y de uso restringido). Los patógenos seleccionados son Actinobacillus peluropneumoniae y Haemophilus parasuis. Inicialmente se llevará a cabo un estudio fenotipico de las resistencias realizando pruebas de sensibilidad antimicrobiana por el método de difusión y determinando las concenctraciones mínimas inhibitorias (CMI) para tetraciclinas y fluoroquinolonas. Se seleccionarán las cepas resistentes. Se realizará una caracterización de los determinantes de resistencia a tetraciclinas (Tet) empleando técnicas de PCR e hibridación. Los genes de resistencia que se aislen serán secuenciados. Asimismo, se cuantificará su expresión en presencia de tretraciclina y se estudiará la presistencia del fenotipo de resistencia. Se estudiará el mecanismo de diseminación de los genes Tet en base a su localización (plasmídica o cromosómica), su composición y la secuenciación de las reg