Análisis de la región genómica que codifica los factores sigma principales RofA y RofB de "Rhodococcus fascians" D188

Résumé

RHODOCOCCUS FASCIANS, es un ac tinomiceto nocardiforme Gran-positvo, con ácidos micólicos en su pared; produce patogenicidad en plantas. Se ha caracterizado una región genómica de la cepa D188 de R. Gasciaus que contien 2 genes que codifica 2 factores simga Rof A y Rof B. Ambos presentan conservadas las regiones características de la familia sigma 70 los dos genes se encuentran en el genoma a una distancia de 8,3 kilobases. Junto al gen raf A se ha caracterizado al gen pgk que codifica una polifosfato glucoquinasa. Se comprobó la actividad quinásica de la proteína de r.fascians, utilizando ATP y polifsfatos como donadores del grupo fosfato. La enzima era activa a termperaturas de entre 25 y 56ª C a altas temperaturas, la enzima de R. Fasciaus utiliza mejor los polifosfatos de cadena larga. Se calcularon las constantes de afinidad (Km) para el ATP y para la glucosa. Se comprobó que la enzima era capaz de fosforilar distintos hexosas y peontosas, además de la glucosa. A 4 Kilobases del gen raf B se localizó el gen dnd R que codifica una proteína reguladora de pendiente de metales. La proteína es inmunorreactiva frente a anticuerpos anti-ATxR de corynebascteruim Dphrherial y se une a las regioens promotoras Tox y Des A a presencia de metales divalentes. Junto al dmdR se localizó un gen galE que codifica una UDP- Galactosa epimerase. Se comprobó la expresión heteróloga del gen y la naturaleza de la enzima codificada.