Identificación y caracterización de micrornas hepáticos como biomarcadores de esteatosis y colestasis por fármacos

Resumen

La lesión hepática inducida por fármacos (DILI) es un problema de salud prioritario y la razón principal de la retirada del mercado de muchos medicamentos. Debido a su patogénesis multifactorial, el DILI puede presentar diversas manifestaciones. Una de ellas, la esteatosis, es la acumulación de triglicéridos en el hígado que, si se cronifica, da lugar a la enfermedad del hígado graso no alcohólico (EHGNA). Los fármacos pueden tener un papel etiológico directo o indirecto, aunque la EHGNA más prevalente es la asociada al síndrome metabólico. Otra manifestación del DILI, la colestasis, se define como la detención del flujo de bilis hacia el duodeno, con la acumulación de ácidos biliares en hepatocitos y torrente sanguíneo. El 42-52% de los pacientes con DILI cursan con colestasis. El diagnóstico actual del DILI se basa en parámetros bioquímicos tradicionales (alanino aminotransferasa, ALT; fosfatasa alcalina, FA…) poco específicos y sensibles. Además, la gravedad de la EHGNA sólo se puede estimar fiablemente en la biopsia hepática. Por ello, es necesaria la identificación y validación de nuevos biomarcadores no invasivos. Los miRNAs, por su papel esencial en multitud de procesos fisiológicos y patológicos y por su estabilidad en los fluidos biológicos, son considerados biomarcadores emergentes de numerosas enfermedades. Sin embargo, los estudios de miRNAs en DILI se han centrado en la hepatotoxicidad intrínseca por paracetamol, y sólo el miR-122 se acepta como biomarcador de diagnóstico y pronóstico en la EHGNA. En la presente tesis, pretendemos profundizar en el estudio de los miRNAs como herramientas no invasivas y predictivas del DILI y sus distintas manifestaciones. Para ello, tratamos células hepáticas humanas en cultivo con fármacos esteatósicos o colestásicos modelo, analizamos su miRNoma para identificar biofirmas singulares, y buscamos su reflejo en el suero de pacientes con EHGNA y DILI colestásico. Los resultados demuestran que, en hepatocitos en cultivo, los fármacos esteatósicos y colestásicos modelo producen alteraciones significativas en el perfil de miRNAs, que son trasladadas al medio de cultivo. Algunos fármacos comunes en pacientes con síndrome metabólico también inducen los miRNAs biomarcadores de esteatosis iatrogénica y podrían estar propiciando la EHGNA. Algunos de estos miRNAs, y otros postulados en trabajos previos, han podido ser validados como biomarcadores no invasivos para la predicción de la gravedad en la EHGNA (esteatohepatitits y fibrosis avanzada). Por otro lado, 4 miRNAs identificados in vitro se encontraron alterados en el suero de pacientes con DILI colestásico, y otros 4 fueron inducidos en pacientes con DILI hepatocelular. En general, estos nuevos biomarcadores no invasivos demostraron mejor rendimiento diagnóstico que los marcadores bioquímicos tradicionales, o permitieron mejorar algoritmos diagnósticos previos, pudiendo así ser postulados por primera vez como biomarcadores para el diagnóstico y clasificación de la hepatotoxicidad idiosincrásica.