Agrupación de genes de biosíntesis de ácido clavulánico en "Streptomyces clavuligerus"análisis de la región corriente arriba del gen "car"

Abstract

Se han identificado 6 nuevos genes dentro de un fragmento de ADN EcoRI-PvuI de 6,5 kilobases situado corriente arriba del gen car perteneciente a la agrupación de biosíntesis de ácido clavulánico. Los dos primeros genes han sido denominados cyp y fd respectivamente, dada la alta similitud de las proteínas deducidas con este tipo de proteínas de otros organismos. Ambas proteínas forman una unidad funcional junto con una NADPH-ferredoxina oxidorreductasa, cuyo gen no esta presente dentro del fragmento EcoRI-PvuI, y que en conjunto forman el sistema citocromo p450 hidroxilasa. La interrupción del gen cyp provoca la pérdida de la capacidad de biosíntesis de ácido clavulánico, sin embargo no se ha podido determinar el punto de actuación de este sistema dentro de la ruta biosintética de ácido clavulánico. El tercer gen, denominado orf-12 codifica una proteína que presenta similitud con la proteína LpqF de Mycobacterium tuberculosis, de función desconocida. La inactivación de este gen afecta negativamente a la producción de ácido clavulánico. La proteína deducida del cuarto gen, orf-13, muestra similitud con permeasas de membrana, y aunque no se ha determinado su papel dentro de la biosíntesis de ácido clavulánico, podría estar implicado en el transporte de intermediarios de la biosíntesis de ácido clavulánico. El quinto gen, orf-14, cuya proteína deducida muestra homología con acetiltransferasas. La inactivación de este gen mediante interrupción génica afecta a la producción de ácido clavulánico, quedando esta disminuída a un 25% de la producción de la cepa silvestre. El último gen, orf-15, codifica una proteína que muestra similitud con proteínas extracelulares que unen oligopéptidos. En Streptomyces coelicolor este tipo de proteína esta encargada de captar oligopéptidos señal que controlan procesos como la esporulación y la producción de antibióticos. La proteína deducida de orf-15