Análisis de la expresión y del procesamiento de los receptores D[1] de Dopamina

Résumé

En el presente trabajo se identifico el receptor d1a y d1b de dopamina en diferentes tejidos de raton mediante la tecnica de pcr, tanto cerebrales como extracerebrales. Asimismo se localizo un posible punto de fosforilacion en el extremo carboxilo-terminal del receptor d1a, ausente en el d1b, que podria explicar sus diferentes propiedades. Se obtuvieron y caracterizaron anticuerpos especificos para cada uno de los receptores d1 y se identifico cada subtipo mediante el uso de estos anticuerpos. Estudiando la sintesis y procesamiento del receptor d1a de dopamina en sistemas de traduccion "in vitro" y en oocitos de "xenopus", hemos demostrado que se expresa con masas moleculares semejantes a las inmunodetectadas en tejidos de raton (entre 66 y 80 kda) y como otra de menor tamaño de 50 kda. Mediante mutagenesis dirigida se ha identificado la asparragina 5 como punto de n-glicosilacion. Este punto, junto con la asparragina 175 serian los responsables, cuando son n-glicosilados, de las masas moleculares de 46 y 50 kda que se detectan en sistemas de traduccion "in vitro". Tambien se ha realizado un estudio comparativo con la expresion de los receptores d2 y d3 de dopamina.