Análisis molecular e inmunodetección de los transportadores de neurotransmisores monoaminérgicos en ratón

Abstract

Mediante la técnica de PCR se han amplificado, clonado y secuenciado fragmentos de DNA que codifican los extremos N-terminales de los transportadores de dopamina, noradrenalina y serotonina de ratón. Se ha estudiado la distribución de los mismos en diferentes áreas cerebrales y tejidos extracerebrales de ratón, encontrándose que se hallan ampliamente distribuidos en las zonas estudiadas, aunque presentan niveles de expresión muy bajos. Se han obtenido anticuerpos policlonales específicos para cada uno de estos transportador, usando proteínas hridas y péptidos sintéticos como antígenos. Con estos anticuerpos se han detectado, en preparaciones de proteínas de mambrana de cerebro de ratón, el transportador de dopamina como una proteína de 82 kDa, el de noradrenalina como una proteína de 70 kDa y el de serotonina como una proteína de 71 kDa. Los anticuerpos obtenidos para el transportador de serotonina nos han permitido inmunodetectar éste en secciones histológicas de encéfalo, detectando la presencia de esta proteína tanto en los cuerpos celulares de neuronas, como en fibras nerviosas pertenecientes a los núcleos del rafe.