Polimorfismo de adn equino. Obtención de marcadores moleculares y su aplicación al control de filiación.

Resumen

Uno de los objetivos de las actuales investigaciones en el campo de la genética animal, aplicada al control de genealogías y selección de reproductores, consiste en encontrar un número mínimo de marcadores genéticos con la variabilidad suficiente para garantizar que no existan dos individuos con las mismas variantes y que la probabilidad de detectar un progenitor falso se aproxime al 100%. El alto grado de polimorfismo y heterocigosidad exhibido por los microsatélites, y su uniforme y aparentemente aleatoria distribución en el genoma de los mamíferos, los hace muy útiles como marcadores genéticos, no solo para su empleo en las tareas de identificación y control de paternidad equinos, sino también, para la construcción de mapas genéticos de alta resolución. En este trabajo: se describen siete nuevos microsatélites en el genoma del caballo y se valoran como marcadores genéticos en relación a otros ya descritos, reteniéndose para su utilización cuatro de ellos, hlm1, 2, 3 y 5. Hlm4 ha resultado monomórfico y hlm6 y 7 no pueden ser empleados en su estado actual. Se aporta una metodología relativamente sencilla para la detección de secuencias similares a partir de bibliotecas genómicas parciales en plasmidos. Se establece un procedimiento rápido de identificación de las variantes alelicas de los microsatélites, mediante amplificación del dna directamente a partir de sangre, utilización de ciclos de pcr con solo dos etapas diferenciadas (desnaturalización y acoplamiento), con separaciones electroforéticas optimizadas por aporte externo de calor y tinción simplificada con plata.