Análisis de la expresión del gen "pab de Streptomyces griseus Imru 3570estudios bioquimicos y geneticos

Zusammenfassung

El gen pab de s. Griseus que codifica para la enzima paba sintasa se ve fuertemente regulado por fosfalto. Este gen fue clonado en un fragmento original de 4 5 kb aunque al expresarse en e. Coli se delecciona un fragmento de 1 kb quedando reducido el tamaño original a 3 5 kb. Esto nos hace concluir que en este fragmento de 1 kb se encuentra el promotor del gen pab que no es reconocido por e. Coli. La enzima paba tiene un peso molecular de 60.000 y un punto isoelectrico de 6. El gen pab de s. Griseus se expresa en e. Coli a partir de promotor del gen de resistencia a tetraciclina kanamicina y el promotor del gen de la b-galactosidasa observandose un aumento de la actividad paba sintasa cuando las celulas crecen en presencia de tetraciclina kanamicina o iptg. Cuando el gen pab de s. Griseus se expresa en s. Lividans solo se observa regulacion po fosfato si lo que se expresa es el gen pab presente en el fragmento de 4 5 kb pero no se observa regulacion pro fosfato si lo que se expresa en el gen pab presente en el fragmento de 3 5 kb. La regulacion por fosfato en este caso es mas fuerte que la que se observa en el gen pab de s. Griseus. De este fragmento de 1kb que contenia el promotor del gen pab y la secuencia de control por fosfato se aislo una secuencia de 113 pares de bases que tenia actividad promotora y responsable de la regulacion por fosfato. Esta secuencia presenta un 85% de homologia con la secuencia de control por fosfato descrita para el gen phob de e. Coli. Esta secuencia de 113 pares de bases se encuentra situada proxima al gen estructural.