Localización y aislamiento de genes de resistencia en la judía (Phaseolus vulgaris L.) y la lenteja (Lens culinaris Medik.)

Resumen

Las secuencias de ADN de tipo NBS de lenteja que se han aislado y analizado (32 secuencias) muestran similitud con los mismos tipos de secuencias de otras especies vegetales especialmente de leguminosas. Las secuencias que codifican para los NBS en lenteja tienen la misma estructura que los genes descritos para otras plantas y tienen todos los motivos conservados que presenta este tipo de genes de resistencia: kinasa-1 (P-loop), kinasa-2a, kinasa-3 y GLPL. Además, muestran otros motivos de función desconocida que aparecen en los genes de resistencia. El estudio filogenético de estas secuencias muestra que los NBS de la lenteja pertenecen a dos grupos principales y se agrupan con la clase TIR de genes de resistencia. La secuencia de ADN en las regiones que flanquean un clon de NBS (3C1) muestra la presencia del dominio TIR en la región N-terminal de esta proteína y seis motivos LRR en el extremo C-terminal. El dominio TIR presenta un alto porcentaje de similitud con los mismos dominios de otros genes de resistencia tanto a nivel de secuencia aminoácidos como en su perfil de hidrofobicidad. Se ha caracterizado la región reguladora 5' de una secuencia de NBS (3C1) que presenta señales reguladoras de transcripción semejantes a las de otros genes de resistencia: cajas TATA, cajas TAATTG y cajas bHLH. El gen de beta-1,3-glucanasa de la lenteja muestra un nivel alto de similitud con los genes de otras especies de leguminosidad, especialmente los de guisante y alfalfa. Se ha detectado menor variabilidad en los genes de beta-1,3-glucanasa entre las especies del género Lens. No se ha podido clonar la secuencia de ADN que codifica para el péptido señal de este gen; posiblemente está separado de la zona que codifica para la proteína madura por un intrón grande. La secuencia de beta-1,3-glucanasa de lenteja clonada codifica para una proteína madura que tiene un peso molecular deducido de 37531 Dalton y pI de 5.86. Las relaciones filoge