Estudios moleculares e inmunobiológicos de la proteína TPBA (receptor de transferrina) de haemophilus parasuis y de otras proteínas de membrana externa con afinidad por la transferrina porcina

  1. Frandoloso, Rafael
Supervised by:
  1. César B. Gutiérrez Martín Director
  2. Elías Fernando Rodríguez Ferri Director

Defence university: Universidad de León

Fecha de defensa: 04 February 2011

Committee:
  1. Lucas José Domínguez Rodríguez Chair
  2. José Ignacio Rodríguez Barbosa Secretary
  3. Francisco Javier Domínguez Juncal Committee member

Type: Thesis

Teseo: 304091 DIALNET

Abstract

Haemophilus parasuis, bacilo Gram negativo, es el agente etiológico de la enfermedad de Glässer, que se caracteriza por poliserositis, poliartritis y meningitis en el ganado porcino. Se trata de una de las enfermedades emergentes de mayor interés en laactualidad por estar relacionada con los nuevos métodos de producción intensiva, de alto estatus sanitario, utilizados en esta especie animal. Hasta la fecha, la industria no ha sido capaz de desarrollar vacunas que protejan de la enfermedad producida por cualquiera de los serotipos en los que se dividide esta especie bacteriana, ya que sólo se han observado respuestas eficaces frente al serotipo homólogo. Teniendo en consideración la importancia del hierro en el metabolismo de H. parasuis, se han desarrollado en esta Tesis Doctoral, diferentes formulaciones vacunales basadas en proteínas directamente implicadas en la adquisición de este oligoelemento al formar parte del receptor dispuesto en la membrana externa de la bacteria. El estudio de su potencial protector se llevó a cabo en cerdos privados de calostro, con especial énfasis en el análisis de la evolución de las diferentes subpoblaciones de células mononucleares de la sangre periférica, de la expresión de citoquinas y quimioquinas implicadas en las respuestas inmunes innata y adquirida y en el estudio de la interacción in vitro de H. parasuis con células epiteliales de riñón porcino. Los resultados obtenidos de la comparación de las cinco formulaciones vacunales pusieron de manifiesto el efecto protector total (100%) de las identificadas como PNATPIM, PNATPIT y PG frente al desafío con una dosis letal (de 3×108 UFC) de la cepa Nagasaki de H. parasuis. Las vacunas rTbpA y rTbpB confirieron únicamente una protección del 33% y 20%, respectivamente, y el grupo de cerdos control, infectados pero no vacunados, desarrollaron los síntomas y lesiones típicos de la enfermedad y murieron durante las primeras 48 horas posteriores a la infección-desafío con una dosis letal de H. parasuis. Por medio de una infección in vitro, se ha demostrado que H. parasuis presenta capacidad para adherirse e internalizarse en células de riñón porcino. Este resultado contribuye a la mejor comprensión de la patogenia de la enfermedad de Glässer.