Metabolismo de poliaminas en promastigotes de "Leishmania donovani infantum"bases para la terapéutica de la leishmaniosis

Resumen

La estrecha relacion existente entre las poliaminas: putrescina, espermidina y espermina, y los procesos de proliferacion rapida, hace de sus enzimas biosinteticas: ornitina descarboxilasa (odcasa) y s-adenosilmetionina descarboxilasa (samdcasa) dianas criticas para la aplicacion de los principios de ehrlich de una terapeutica racional. En nuestro trabajo hemos identificado el metabolismo de poliaminas en promastigotes de leishmania infantum, tripanosomatido intracelular responsable del kala-azar infantil y de la leishmaniosis canina en españa, partir de sus presursores: l-ornitina y l-metionina, analizando los niveles intracelulares de poliaminas libres y conjugadas y las actividades odcasa y samdcasa a lo largo de la curva caracteristica de crecimiento. El uso de inhibidores de la biosintesis de poliaminas con alto efecto antiproliferativo, como el difluormetilornitina (dfmo) o el berenil, se contrapuso al escaso efecto del metilglioxal bis (guanilhidrazona) y analogos. El hecho de que poliaminas exogenas revirtieran el efecto del dfmo, nos hizo estudiar el transporte de las mismas. Los promastigotes de l.Infantum internalizan espermidina por un sistema de difusion facilitada, mientras que la putrescina es transportada por un sistema de transporte activo y especifico de elevada afinidad. El transporte de putrescina es regulado por el estado multiplicativo de las celulas y es fuertemente inducible (3 a 5 veces) por la deplecion de los niveles internos de putrescina y sobre todo de espermidina. La induccion de la internalizacion de putrescina se debio la sintesis de novo de transportadores y no a cambios en la afinidad por el sustrato. Dicho transporte fue capaz de restaurar la multiplicacion de celulas tratadas con un antimetabolito y de recuperar las concentraciones intracelulares de poliaminas. El transporte de putrescina y espermidina fue inhibido por el berenil a concentraciones micromolares, condicion que se uti