Caracterización de la ruta biosintética de lisina en "Penicillium chrysogenum"clonación, secuenciación, análisis y disrupción génica del "locus lys2"

Laburpena

En esta Tesis Doctoral se describe la clonación del gen lys 2 de P. chrysogenum, este gen se caracteriza por la presencia de dos marcos de lectura abierta solapados; el primer marco de lectura (ORF1) codifica una proteína de 115 aminoácidos, el codón de terminación de la ORF1 solapa en nucleótido con el codón de inicio de la traducción de la ORF2. Este último marco de lectura codifica una proteína de 1.296 aminoácidos y es la responsable de la actividad alpha-aminoadipato reductasa. En la proteína deducida de la ORF2 se encuentran presentes todos los dominios necesarios para llevar a cabo la actividad asignada a la sununidad grande de la alpha-aminoadipato reductasa. Por otra parte la caracterización del gen lys2, puso de manifiesto, que éste se transcribe como un mRNA de 4,7 kb y que la transcripción de dicho gen está regulada por la presencia de lisina en los caldos de cultivo, tanto en la cepa silvestre de P. chrysogenum, como en la cepa Wis 54.1255. También se describe en esta memoria el primer caso de disrupción génica en P. chrysogenum.