Aspectos estructurales y cinéticos de la interacción ligando-receptor relevantes en la farmacología de la esquizofrenia

Zusammenfassung

RESUMEN DE LA TESIS En este trabajo, se investigó en primer lugar la relevancia de ciertos determinantes estructurales en el bolsillo de unión de receptores acoplados a proteínas G (GPCRs) pertenecientes al receptoroma de antipsicóticos, para la afinidad y selectividad de dos antipsicóticos atípicos de gran relevancia farmacológica y clínica, clozapina y olanzapina. Partiendo de un análisis biocomputacional multirreceptorial de los perfiles de afinidad de ambos fármacos por distintos GPCRs así como de datos de modelización y acoplamiento ligando-receptor disponibles, se generaron receptores (serotoninérgico 5-HT2A, dopaminérgico D2) mutados en posiciones de interés y se determinó la afinidad de ambos antipsicóticos mediante ensayos de unión de radioligandos de competición en el equilibrio, identificándose posiciones aminoacídicas cuya identidad es relevante para el perfil de afinidad y selectividad de estos fármacos. Por otra parte, se abordó un estudio de las cinéticas de interacción del antipsicótico atípico lurasidona con uno de los GPCRs diana más relevante en su perfil farmacológico, el receptor de serotonina 5-HT7. Así, se cuantificó el parámetro tiempo de residencia del fármaco en dicho receptor en ensayos de unión de radioligandos cinéticos mediante el método de competición cinética de Motulsky y Mahan. Esto supuso la puesta a punto y la ejecución de un primer paso de cara a la caracterización del perfil de selectividad cinético de lurasidona. La determinación del parámetro tiempo de residencia permitió obtener información farmacológica relevante relativa al fármaco. Por último, se estudió la relevancia para las cinéticas de interacción ligando-receptor de la identidad de un residuo en el bucle extracelular 3 del receptor de adenosina A2A, receptor postulado como de interés terapéutico en esquizofrenia. Mediante ensayos de unión de radioligandos cinéticos, se pudo comprobar que dicho residuo, identificado como de potencial interés en base a datos de simulación de dinámica molecular, resulta determinante para la cinética de disociación del radioligando antagonista A2A-selectivo [3H]-ZM241385.