Nuevas técnicas para el estudio de cepas ovinas de Fasciola hepatica con diferente origen y grado de resistencia a fármacos antihelmínticos

Resumen

El objetivo general del presente proyecto de Tesis Doctoral ha sido desarrollar, aplicar y evaluar nuevos métodos de diagnóstico y control frente a la fasciolosis ovina.Este objetivo se divide en otros específicos: Estudiar la variabilidad genética de diversas poblaciones mundiales de F. hepatica mediante el uso de la técnica de PCR de intersecuencias simples repetidas (Inter Simple Sequence Repeat-PCR, ISSR-PCR) con la finalidad de conocer la variabilidad intrapoblacional e interpoblacional. Mejorar el diagnóstico de la infección por F. hepatica mediante la puesta a punto de técnicas de biología molecular como la “reacción en cadena de la polimerasa” (PCR), basada en la amplificación del gen que codifica para el espaciador interno transcrito (ITS2) del ADN ribosomal. La sensibilidad de la técnica se comparó con otras tres técnicas de diagnóstico de fasciolosis tales como la reducción fecal de huevos en heces (FECRT) y la detección del coproantígeno mediante un ELISA sándwich. Emplear la PCR anteriormente descrita para la detección de resistencias antihelmínticas en rebaños de ovejas infectados de forma natural por F. hepatica. Desarrollar una técnica in vitro como es el ensayo de eclosión de huevos (egg hatch assay, EHA), para la detección de resistencias antihelmínticas al albendazol y triclabendazol en diferentes cepas de F. hepatica